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吳亞軒:用生物方法“征服”小麥赤霉病的本科生

發(fā)稿時間:2018年03月16日來源:南農(nóng)新聞-NJAU NEWS作者:蔡漪鈴

8月27日,剛參加完iGEM在福建農(nóng)林大學召開的中國地區(qū)交流會(Conference of China iGEMer Community,CCiC)的吳亞軒馬不停蹄趕往中科院下屬的上海國家蛋白質(zhì)科學中心。此行,他希望能擺脫兩個月構建不出載體的厄運,將雪腐鐮刀菌烯醇(DON)轉(zhuǎn)乙?;富驑嫿ǖ皆吮磉_載體中,轉(zhuǎn)入大腸桿菌中進行原核表達,并進行相關蛋白的純化,使大腸桿菌具乙?;疍ON毒素的能力。

歷經(jīng)酶切酶轉(zhuǎn)化等一系列步驟,吳亞軒將挑選出的大腸桿菌轉(zhuǎn)化子送到生物公司進行測序。也許真的是因為實驗環(huán)境的原因,在抵達上海的第四天,他看著電腦中顯示的測序結果,知道載體已經(jīng)基本構建成功了。

其實,這已經(jīng)是他第二次為了iGEM實驗奔赴上海了。

  

“你見過凌晨四點的南農(nóng)嗎?我見過?!?/p>

就讀于生科基地班的吳亞軒很早便知道了iGEM這項國際大賽。參加了校級比賽后,他從學長學姐口中得知學校正在選拔人員參加即將在美國波士頓舉辦的“國際基因工程機械設計大賽”。參加國際比賽很厲害、iGEM和SRT相比更考驗學生的自主科研能力……考慮了種種因素,吳亞軒抱著試一試的心理,從多名參選同學中脫穎而出,成為預備隊員。

南農(nóng)在近三年均派出隊伍赴美參賽并取得兩銀一金的佳績,周圍人都對這支隊伍抱有極高期待。入選的二十幾個人圍在生科樓E2004天馬行空地想一個個課題,然后被隊長和教授們一個個PASS掉?!皩嶋H上,很多想法并不成熟?!弊詈?,大家決定將“小麥守護者”作為比賽課題,用生物方法防治小麥赤霉病。

敲定課題前,團隊對其進行了可行性分析。“評估課題的可行性不是查查資料問問老師就萬事大吉了,”內(nèi)穿紅色格子衫,外套紅色沖鋒衣的吳亞軒健談而嚴謹,“大量查閱文獻幫助了解哪些基因能降解毒素,與此同時,一些研究過小麥赤霉病的專家向我們提供了一些圖片,讓我們獲知感病小麥的表現(xiàn)性狀,更全面地了解實驗意義?!?/p>

按照規(guī)劃,實驗組分為四步走:感受——降解轉(zhuǎn)乙?;志湍缸詺ⅰ?/p>

他所在的生科院為團隊提供了最好的資源,能優(yōu)先使用大學生創(chuàng)新實驗室,院里的專家教授也常詢問課題進展。然而,一間實驗室不可能具備實驗所需要的全部儀器。

他用“到處借”形容幾個月前的科研生活?!百|(zhì)粒是借的,像流式細胞儀、高效液相色譜儀這種高端儀器全靠蹭,等人家用完我再用。”有時做完實驗,黎明的第一束光已透過玻璃打在實驗臺上。

在前期,為了簡化實驗,提高效率,載體不會直接構建到小麥細胞中而是先導入大腸桿菌以觀察能否成功表達。吳亞軒的任務是構建AYT1基因的表達載體。引發(fā)小麥赤霉病的雪腐鐮刀菌會產(chǎn)生DON毒素,誤食毒小麥將對人畜健康造成影響。這種基因編碼的酶可將DON毒素的毒性通過轉(zhuǎn)乙?;档?00倍。

構建載體的過程并不如想象的一帆風順,每個熬夜做實驗的夜里,吳亞軒揉著幾乎要合上的雙眼盯著培養(yǎng)基的變化,卻只能再次證明導入載體的大腸桿菌不能在含有DON毒素的選擇培養(yǎng)基上存活。由于沒有親身實驗,周圍人也說不出個所以然來,只能說你再試試吧。這一試就是兩個月,遲遲找不到失敗的原因讓他有些崩潰,感覺借來的質(zhì)粒和他開了個大玩笑。

  

征服“任性”了兩個月的質(zhì)粒先生

7月18日,作為生科基地班的一員,他得到了去上海國家蛋白質(zhì)科學中心實習的機會。團隊并未要求成員在暑假留下實驗,但大多數(shù)人都放棄了50天的超長假期,家在遼寧的吳亞軒也不例外。他把這解釋為一種“榮譽感”——“沒做完實驗好意思回家嗎?”在中科院實習的十多天時間里,吳亞軒始終惦記著手上還未完成的任務,畢竟自己的任務在實驗的第二步,沒有及時完成多少會對后面的實驗造成影響。導師黃旲為吳亞軒開了綠燈,允許他使用實驗室內(nèi)的所有儀器,導師帶的師姐也常給予他力所能及的幫助,實習過程中的所見所聞拓寬了他的視野,他思考著:以往實驗均使用真核生物構建表達載體,既然構建載體的目的是檢測酶的效果,改用原核生物的質(zhì)粒是否能提高實驗的成功率呢?

事實證明他是正確的。上海之行,讓他意識到蛋白質(zhì)結晶研究方向的發(fā)展前景,而他兩次只身赴上海做實驗的舉動讓導師黃旲在驚訝之余對他產(chǎn)生深刻印象。

“我跟他們那邊關系還不錯,過幾天我還要去上海一趟,以后可能會經(jīng)常去,嘻嘻。”

某天,他在地鐵上有感而發(fā):每條早晨,都感受著上海上班一族的辛苦,從岳陽路乘地鐵趕到18公里外的國家蛋白質(zhì)科學中心,然而理應越靠近終點人越少,實際卻恰恰相反,很多人同我一樣要在郊區(qū)工作。

  

一位名叫“薛定貓餓了嗎”的UP主

在bilibili網(wǎng)站上,UP主薛定貓餓了嗎只上傳了一個作品:《2017年南京農(nóng)業(yè)大學iGEM團隊課題介紹視頻》。視頻中,一把小麥被打成勻漿,滴入置有微流控制芯片的涂板上,當小麥赤霉病菌引起的DON和ZEN毒素超標時,便會產(chǎn)生熒光現(xiàn)象……雖然是全英文配音,觀眾還是能從惟妙惟肖的動畫中大致了解課題的大致思路。。

制作宣傳片是吳亞軒在臨近赴美參賽的日期時接到的任務,他以能者多勞的心態(tài)接下這份自己從未接觸過的工作。剛開始他也不知如何下手,在朋友建議下制作了200張PPT,在放映模式下使用錄播軟件進行錄制。為了顯示更好的效果,他自學了Flash、Ae、Pr等軟件,兩分多鐘的視頻,他和其他三個同學用了三個晚上完成。

其中的兩個人并非參賽隊員,而是院科協(xié)的成員,自告奮勇陪吳亞軒熬了三天的夜做小視頻。吳亞軒的另一個身份,是院科協(xié)主席,在他看來,科協(xié)的人際關系較為簡單,而科協(xié)存在的意義,就是進行科普宣傳,幫助大學生拓寬知識面。

“很多人為學時而來,來了卻做著自己的事情,讓活動發(fā)起者寒心,”對于PU上活動僅限生科院同學參加的規(guī)定,他這樣解釋,“一些學術大佬的講座只要你愿意參加,大門隨時敞開。但很多人卻把這種珍貴的機會折合成學時計算,外院同學只是沒有學時而已,但在講座上獲取的知識是不能和兩個PU學時相提并論的?!?/p>

在采訪進入尾聲時,我小心翼翼地問了他一個問題:“當時為什么沒有去美國?”

“被拒簽了?!?/p>

當時,簽證官問了他叫什么,英文如何,去美國做什么等問題。在他自我感覺良好地覺得即將能親眼見到自由女神像的時候,穿著西裝的簽證官遞給他一張白紙,說了聲“Sorry”。

被拒簽這件事其實對吳亞軒的影響并不大,在他看來其實過程更重要。一路走來,曾經(jīng)因?qū)嶒灲Y果深受打擊,也被“你再想想”這句話搞得郁悶不已。科研有時就像場賭博,會因挫敗心痛不已,但總要抱著由已知探索為未知的積極態(tài)度堅持下去。

經(jīng)過將近一年的努力,南農(nóng)NAU-CHINA團隊于今年11月14日再獲“國際基因工程機械設計大賽”金獎,不過吳亞軒對整個課題的完成結果還是不大滿意。

“如果課題完成度達到你想要的效果,你覺得這對產(chǎn)品的轉(zhuǎn)化推廣有什么意義嗎?”我問他。

沒想到他一下子興奮起來,與我分享了構思300多天的課題發(fā)展遠景。

  

在寧靜的午后,幾架無人機飛過山崗在綠油油的麥地上空盤旋,攝像頭咕嚕嚕地轉(zhuǎn)動,根據(jù)數(shù)據(jù)庫中小麥的圖像比對判斷所在區(qū)域感病小麥的數(shù)量。隨后,另一撥滿載生物抑制劑的無人機飛抵麥地上空,向指定區(qū)域噴灑生物抑制劑。本以為適應了多菌靈(抑菌化學藥物)就可以放肆侵染小麥的雪腐鐮刀菌在叫囂著“我一定會回來的”后永遠閉上了雙眼。

秋天,聯(lián)合收割機開過金色的麥地。采收的小麥在加工前被送入實驗室抽檢,毒素超標的小麥將送入含有酶的降解設備里,等待“重獲新生”。

而這種可降解毒素的酶中,就含有吳亞軒花了兩個多月時間導入的基因AYT1。


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